研成胰腺导管腺癌，最致命的人恶性肿瘤之一，是由生理上准确原地小鼠模型的发展极大地推进。具有PDA中四种常见基因改变的各种组合的基因工程模型，已成功地表彰该疾病的常见组织病理学特征，并促进对胰腺肿瘤完整病程的高度详细的研究从恶性肿瘤的早期发展到传播转移。KrasLSL.G12D/+代表了这种方法。Tp53R172H/+；Pdx1–cretg/+模型，已被证明不仅成功概括肿瘤的组织病理学，而且还成功概述人类PDA伴随的间质性增生，免疫抑制以及副肿瘤合并症，例如黄疸，腹水和恶病质。但是，尽管传统的遗传工程在PDA建模方面取得总体成功，但仍有几个主要缺点限制这些模型的应用，解释和一般可用性。首先，复合突变体模型的产生需要具有低输出比率的复杂育种方案，而驱动大多数PDA模型的KrasLSL.G12D等位基因的纯合杀伤力使情况更加恶化。其次，Cre诱导的Kras和其他等位基因的重组在整个胰腺中广泛分布，并开始于早期发育。第三，KPC模型是表型上的Kras/Tp53在非胰腺谱系中，杂合子无效。第四，早期胰腺肿瘤的检测需要使用解剖学成像方式，例如超声或磁共振成像。最后，引入额外的突变等位基因需要数年的育种计划，并进一步降低育种率，这使得该系统在常规遗传分析中不切实际。理想的小鼠模型将需要最少数量的工程等位基因，实现基因诱导的时空控制，在遗传正常宿主的背景下诱导肿瘤，整合成像报告功能并易于进行进一步的基因修饰。
　　 随着体细胞基因组编辑技术的出现，一些小组试图改进KPC模型以解决这些局限性。CRISPR/Cas9技术利用RNA引导的内切核酸酶靶向哺乳动物基因组中特定位点的缺失，突变或其他改变，如小指导RNA的序列所指导。该系统的组成部分可以通过转导方法或通过基因工程体内引入。在胰腺癌中，较早的研究将Cas9工程化到小鼠种系中，然后依靠慢病毒转导来递送表达sgRNA3的载体。然而，这些方法由于慢病毒的低转导效率而受到限制，这在很大程度上排除对不同基因的多重靶向。相比之下，AAV可以在体内实现更高的转导效率，并且几乎没有毒性，仅产生轻度的免疫反应。最近利用这些特性，基于AAV提供的体细胞编辑为PDA开发一种快速鼠标模型。
　　 对于这种基于AAV的新模型，与p48Cre杂交Rosa26LSL.Cas9等位基因，从早期胚胎发育中获得胰腺限制的Cas9表达。没有其他改变被工程化到小鼠基因组中，从而实现改进的育种方案，其中所需的基因型在50％的子代中产生。利用该菌株，可以使用表达sgRNA的各种组合的AAV载体来工程化所需的改变。该系统的关键进展是成功使用模板序列诱导特定的错义突变在Kras中，可以使胰腺内源性KrasG12D特异性表达作为PDA的启动驱动器；早期胰体细胞编辑的研究仍然需要使用的嘉士LSL.G12D等位基因，可能是因为慢病毒转导的效率较低。在组织学正常的胰腺组织中，模板指导的Kras突变足以诱导胰腺上皮内瘤变前体病变的形成。通过使用其他AAV传递的sgRNA进一步灭活包括Tp53在内的肿瘤抑制基因，可以进一步补充这一点，Arid1a或Lkb1，在人类PDA中都以一定的频率改变。重要的是，这些不同的等位基因组合导致不同的肿瘤组织病理学，通常与来自以相同遗传改变进行基因工程改造的小鼠的发现一致。从降低的育种率开始，这种新模型比早期模型具有多个优势。另外，小鼠中的非靶向细胞是遗传野生型的，避免KPC模型的细微但重要的误差。但是，最大的优势是能够在体内快速靶向其他感兴趣基因的遗传改变，甚至诱导Kras中不同的特定突变。该系统的修改也可以使成像等位基因的整合促进体内肿瘤的检测和监测。
　　 关于局限性，最令人担忧的是sgRNA介导的肿瘤抑制基因靶向选择纯合缺失。胰腺中具有Kras突变和Tp53纯合缺失的工程，小鼠开发出非常快速和具有侵略性的多克隆PDA，该PDA无法准确反映人胰腺肿瘤的生理学。报道的AAV/Cas9'KP'小鼠的动力学和组织病理学中也很明显。此外，Tp53和其他肿瘤抑制基因经常通过错义突变而改变而不是坦率的删除，并且由此产生的突变等位基因具有重要的新功能。是否有可能使用模板指导的修复来靶向同一细胞中的两个不同的错义突变，尚待观察。
　　 有关此AAV体细胞编辑模型的其他几个问题仍未得到解答。与KPC模型一样，该模型是否可以重现人PDA对化学疗法的治疗反应？小鼠是否会发展出PDA合并症，例如恶病质？如在其他一些体细胞编辑模型中所观察到的，Cas9是否诱导免疫反应。对病毒感染的反应本身是否会影响肿瘤的发展？此初始报告是新平台的一个很好的起点，但是可能有必要进行更全面的描述，以鼓励新平台的广泛采用。将来，此模型系统和相关的模型系统有可能成为强大的发现工具，例如通过对顺序突变的时间效应进行分析成为可能。sgRNA文库的纳入将使新型的体内遗传筛选成为可能。最后，我们预计能够快速产生具有各种定义的遗传组成的小鼠的能力将能够研究治疗反应的遗传依赖性。